HORIBAの製品が採用しているイムノアッセイは、迅速・簡便・安価に残留農薬を分析する事が出来ます。より効率的に分析を行うために、HORIBAは残留農薬測定システムをご提供します。残留農薬測定システムは「前処理」「イムノアッセイ」「吸光度測定」「レポートの作成」で構成されており、様々な残留農薬測定に対処出来るよう考えています。以下に標準的なシステムにおけるプロセスをご紹介します。
(1)
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農産物を一定の大きさに細切します(トマトの場合、4等分程度)。
異物混入を防ぐため、手袋を着用して下さい。
可食部を測定しますので、ヘタなどは取り除いて下さい。
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(2)
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細切した農産物をジューサーなどで磨砕し均一化します(磨砕時間 約1分間)。
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(3)
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磨砕均一化したものを秤量皿に取り、遠心管に5gを秤取します。
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(4)
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メタノール25mLを遠心管に加えます。
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(5)
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振とう機を使い、磨砕均一化した農産物をメタノールで振とう抽出します(振とう時間 約30分間)。
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(6)
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脱脂綿を詰め込んだシリンジに振とう抽出した液(約5mL)を注ぎ込み、ピストンをゆっくりと押し出してろ過します。
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(7)
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ろ液1mLを精製水7.5mLの中に加えて試料(10%メタノール抽出液)とします。ろ液はメタノール溶液ですので、作業を迅速に進めて下さい。
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(8)
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測定キットの標準試薬LおよびHに10%メタノール1mLをマイクロピペットで加えて溶解し、再構成します。
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(9)
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測定キットの酵素標識物試薬に精製水6mLを加えて溶解し、再構成します。
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(10)
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試料150μLまたは標準試液150μLを試験管に取り、それぞれに酵素標識物試液150μLを加えて混合し、それぞれ試料混合液または標準混合液とします。
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イムノアッセイ工程(約90分間)
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(11)
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抗体プレートのウェルに、試料混合液または標準混合液100μLずつをマイクロピペットで分注します(精度を上げるため、2重測定で行います)。その後ストリップの使用ウェルに合わせて切断したプレートシールを貼り、室温で免疫反応を行います(60分間)。
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(12)
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免疫反応後、プレートシールをはがしてマイクロプレートを洗浄します(3回)。ウェルの底に洗浄試液が残っていない事を確認して下さい。
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(13)
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洗浄したマイクロプレートにマイクロピペットで発色試薬100μLを添加し、室温で発色反応を行います(10分間)。各ウェルの発色反応時間が正確に10分間となるように注意して下さい。反応が進むにつれ、徐々に青色に呈色します。
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(14)
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正確に10分間が経過した後、マイクロピペットで発色停止試薬100μLを添加します。瞬時に黄色に変色します。
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(15)
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発色停止試薬添加後15分間以内にマイクロプレートをスマートリーダーにセットし、吸光度を測定します。
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